蛋白質印跡法又叫做免疫印跡法,這是一種能夠對固定在固相載體上蛋白質進行檢測的免疫化學技術方法。待測蛋白除了可以為粗提物,而且還能夠經過一定的分離和純化。應用該項技術,待測蛋白的單克隆或多克隆抗體需要被利用來進行識別??扇苄钥乖簿褪谴郎y蛋白的分離首先需要按照如分子量,分子大小,電荷以及其等電點等性質的差異采用不同的電泳方法。凝膠中的蛋白質通過電流被轉移到聚偏二氟乙烯膜上。目的蛋白的釣取可以以抗體作為探針利用抗體(一抗)與抗原發生特異性結合的原理來進行。尤其留心的是在將一抗加入之前,首先需要將非特異性蛋白加入,例如膜被牛血清白蛋白“封阻”,而使膜的非特異性結合得以避免。
蛋白印跡儀被廣泛應用于臨床診斷領域,如篩選和確診引起感染性疾病的不同致病源(如病毒或細菌),以及過敏原鑒定。全自動蛋白印跡儀能將蛋白印跡處理中的所有關鍵步驟自動化,尤其是繁瑣的清洗和孵育步驟。為了保證儀器的性能,我們需要定期進行一些維護。
(1)清潔吸引泵(吸引泵堵塞是吸引無法進行的普遍原因)。啟動本儀器。選擇任何分析,進入泵初始化常規。將沖洗泵初始化一次,然后開啟吸引泵。從儀器背面將當前工作的管道連接至廢物瓶。在廢物瓶蓋處中斷該管道并將該管道放置于盛有近10ml水的燒杯中。應用初始化常規吸引所有10ml水。將該管道重新連接至廢物瓶蓋.
(2)校準泵。泵校準常規用于調節每臺泵的開啟時間。在管道系統與泵的連接方式、與時間相關聯的泵磨損度,以及制造方面的容許限度等方面允許存在差異。即使儀器在出廠時校準過,最好每年重新核對校準一次,或者只要泵管道系統更換則隨時校準。在“進入編輯模式?”提示時按NO鍵即進入泵校準常規。在校準泵之前最好將泵初始化。AutoBlot 在校準常規開始前將提示你初始化泵。注意:在校準泵之前,確定壓力墊已被鎖定至少1小時,以便接近真實的操作狀態。
(3)檢查孵育定時器。孵育持續時間顯示在儀器的前屏上。用秒表每年校驗一次。由于(前屏)顯示并未精確到秒,務必在周期開始時或(前屏)顯示時間一更新就啟動秒表
(4)如有需要將該儀器返回制造商進行預防性維護檢查。更換新的管道系統,重新校準泵,整臺儀器重新潤滑和清潔,軟件升級到最新版本。